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目的
评价信号素3A刺激的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)膜片对2型糖尿病大鼠新骨形成的影响。
方法通过注射链脲佐菌素构建2型糖尿病大鼠模型,分离、培养BMSC并鉴定,诱导成膜;使用随机数字表法将15只2型糖尿病大鼠随机分为对照组、膜片组、信号素3A膜片组(每组5只),构建大鼠颅骨极限骨缺损模型,对照组植入骨粉,膜片组植入BMSC细胞膜片和骨粉,信号素3A膜片组植入用1.0 mg/L信号素3A刺激的BMSC细胞膜片和骨粉,8周后取材分别行显微CT扫描及HE染色,分析新骨形成情况,免疫组化观察Ⅰ型胶原、骨形态发生蛋白2和骨钙蛋白的表达。
结果分离培养的2型糖尿病大鼠BMSC经茜素红、油红O染色鉴定具有多向分化潜能。构建大鼠颅骨极限骨缺损模型8周后,显微CT扫描可见,信号素3A膜片组新骨形成最多,骨体积分数(bone volume/tissue volume,BV/TV)(0.516±0.070)显著大于膜片组(0.319±0.050)和对照组(0.224±0.037)(P<0.05),膜片组BV/TV显著大于对照组(P<0.05);而3组骨小梁厚度差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色分析显示,信号素3A膜片组新骨形成比值(0.421±0.069)显著大于膜片组(0.174±0.051)和对照组(0.099±0.033)(P<0.05),膜片组新骨形成比值显著大于对照组(P<0.05)。免疫组化染色观察可见,膜片组Ⅰ型胶原、骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白阳性表达多于对照组,而信号素3A膜片组Ⅰ型胶原、骨钙蛋白阳性表达多于膜片组和对照组。
结论联合植入信号素3A刺激的BMSC细胞膜片和骨粉,可显著增加2型糖尿病大鼠的骨再生能力。