【摘 要】
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利用聚合酶链式反应(PCR)技术从毕赤树干酵母的基因组中扩增得到木糖还原酶基因xyl1和木糖醇脱氢酶基因xyl2,它们分别或同时与高拷贝型酵母表达载体YEp24重组,再经醋酸锂转化
【机 构】
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南京林业大学化学工程学院,南京林业大学森林资源与环境学院
【基金项目】
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江苏省高技术计划项目（BG2005327）,江苏省高校自然科学重大基础研究项目（06KJA22015）,国家973计划（2007CB70801）
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利用聚合酶链式反应(PCR)技术从毕赤树干酵母的基因组中扩增得到木糖还原酶基因xyl1和木糖醇脱氢酶基因xyl2,它们分别或同时与高拷贝型酵母表达载体YEp24重组,再经醋酸锂转化酿酒酵母,得到了3种不同类型的重组酵母菌株,其中重组酿酒酵母菌株NLR04可利用单一的木糖为碳源进行生长,并能够在微氧或厌氧环境中缓慢发酵木糖生成乙醇,乙醇得率可达到理论得率的37.0%。该研究可为微生物的木糖代谢工程提供种质资源。检测结果表明,与毕赤树干酵母不同,在重组酿酒酵母中木糖还原酶基因以组成型表达,而木糖醇脱氢酶基因在某种程序上受木糖的诱导。与毕赤树干酵母相比,重组酿酒酵母菌株中的木糖醇脱氢酶的比活力明显较低,这说明在ScNLR04中该基因的表达存在某些抑制作用,这一缺陷可能是重组酵母菌株发酵木糖的瓶颈之一。
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