【摘 要】
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目的调查南方地区中国人肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)196位基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的关系并构建野生和突变的反转录病毒载体以研究其功能差异。方法利用聚合酶链反应
【机 构】
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中山大学附属一院肾内科卫生部肾脏病临床研究重点实验室; 中山大学附属一院肾内科卫生部肾脏病临床研究重点实验室 510080广州; 510080广州;
【基金项目】
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中山医科大学“211”工程资助项目(98151);教育部博士点资助项目(082005)
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目的调查南方地区中国人肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)196位基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的关系并构建野生和突变的反转录病毒载体以研究其功能差异。方法利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测了106例SLE和119名健康人TNFRⅡ196位的基因型。将扩增TNFRⅡ196McDNA克隆到PMD18-T载体上,定点突变为TNFRⅡ196R,然后亚克隆到反转录病毒载体PLXSN上(PLXSN-TNFRⅡ196M和PLXSN-TNFRⅡ196R)并分别转染大鼠系膜细胞,以四甲基偶氮唑(MTT)法观察对系膜细胞增生的影响。结果①SLE组TNFRⅡ196R等位基因型明显高于正常组(35.2%vs14.3%,P<0.05);②成功构建野生型和突变型重组反转录病毒载体;③rhTNF-α刺激后196R型转染系膜细胞的增生明显高于196M型(P<0.05)。结论TNFRⅡ196R与中国南方地区SLE相关,其可以高效传导TNF-α的信号,可能参与SLE的发病。
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