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用中性0.1M焦磷酸钠提取,经硫酸铵分段,丙酮沉淀,从土壤中获得了具有蛋白酶活性的酶-腐殖质复合物,其特性:反应最适pH为9.0,反映最适温度为50°—60℃,温度系数Q_(10)(17°—40℃)为1.93,K_m值为0.97—1.00毫克酪素/毫升,V_(max)值为74.91—75.35毫克酪氨酸/克·24小时,与原位土壤蛋白酶相比,反应最适pH往碱性偏移,反应最适温度及K_m值变小,热稳性降低,Q_(10)和V_(amx)值增大。土壤经超声波分散后,可以用各种盐缓冲液将其中具有蛋白酶活性的酶-腐殖质复合物提取出来,其收率依次为水<0.1M磷酸盐-0.3M KCl-0.01MEDTA<三羟甲基氨基甲烷(pH7)<0·2M碳酸氢钠<0.05 M磷酸盐-柠檬酸<0.1M焦磷酸钠溶液。
With neutral 0.1M sodium pyrophosphate extraction, the ammonium sulfate fractionation, acetone precipitation, obtained from the soil protease activity enzyme - humus complex, its characteristics: the optimum pH of 9.0, reflecting the optimum temperature of 50 ° -60 ° C, the temperature coefficient Q_ (10) (17 ° -40 ° C) was 1.93, K_m was 0.97-1.00 mg casein / ml and the V max was 74.91-75.35 mg tyrosine / g · 24 Hour, compared with in situ soil protease, the optimum pH of the reaction shifted to alkaline, the optimum reaction temperature and K_m value became smaller, the thermal stability decreased, and the values of Q_ (10) and V_ (amx) increased. After the soil is dispersed by ultrasonic waves, the enzyme-humus complex having protease activity can be extracted with various salt buffers in the following order: water <0.1M phosphate-0.3M KCl-0.01MEDTA
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