基于Endo-M N175Q糖链转移反应与丙酮富集糖肽的LC-MS分析糖蛋白N-糖链

来源 :分析测试学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Moke_jlsf

【摘要】

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基于化学酶标记和丙酮富集糖肽方法,建立了一种可靠、有效、简单的糖蛋白N-糖链分析方法。以唾液酸糖肽(SGP)为模型糖肽,比较了样品中丙酮加入量对SGP的富集效果,最终选择加

【作者】

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陈奕彤张斯然张春波金东日

【机构】

：

延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室

【出处】

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分析测试学报

【发表日期】

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2018年11期

【关键词】

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糖蛋白 N-糖链酶标记液相色谱-质谱(LC-MS) glycoprotein N-glycan enzymatic labeling LC-MS

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(21365022,21565027)

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基于化学酶标记和丙酮富集糖肽方法,建立了一种可靠、有效、简单的糖蛋白N-糖链分析方法。以唾液酸糖肽(SGP)为模型糖肽,比较了样品中丙酮加入量对SGP的富集效果,最终选择加入样品体积5倍量的丙酮。用丙酮富集经胰蛋白处理的核糖核酸酶B(RNase B)酶解液中的糖肽,以富集分离得到的糖肽(糖基供体)和PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc(糖基受体)作为酶反应底物,进行Endo-M N175Q的转糖基反应,得到PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc-N-糖链标记物。采用YMC C 18色谱柱为分析柱,10

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