人源细胞色素P450 2E1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :南京医科大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyaizy
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目的:人源细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)基因克隆及其表达,方法:采用RT-PCR方法对我国汉族人CYP2E1基因进行了克隆,并利用pET-32a(+)原核表达载体进行了表达.结果:经过酶切与测序鉴定表明扩增的CYP2E1基因含有完整的编码序列,除该基因编码区第1 263位核苷酸发生C→T的突变(未引起氨基酸发生突变)外,其他核苷酸与氨基酸序列与GenBank中登录发表的人CYP2E1基因完全相同.SDS-PAGE分析结果显示该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)后在BL21(DE3)大肠杆菌中成功表达.结论:该基因的成功表达为开展临床前药物安全性评价与药物代谢分析的后续工作打下了基础.
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