目的探讨人脱细胞羊膜(Human acellular amniotic membrane,HAAM)负载大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)进行膀胱替代修复的可能性。方法用去污剂洗涤和酶消化方法制备HAAM。将大鼠MSCs在体外培养、扩增、传代。取第4代干细胞用1%二甲亚砜(DMSO)预诱导8 h,然后应用膀胱匀浆上清液诱导7 d。将诱导分化后的MSCs接种于HAAM表面进行短暂体外培养,获得组织工程膀胱。将雄性大鼠60只随机分为3组,行半膀胱切除术,然后分别采用负载干细胞后的HAAM(A组)、HAAM(B组)以及单纯缝合(C组)的方法进行修补,每组20只。分别于术后2、4、8 w测定膀胱容量、进行膀胱造影并取材观察组织再生情况。结果去污剂洗涤联合酶消化法能有效去除人羊膜中的细胞成分,光镜及电镜观察无细胞成分残留,细胞相容性好。大鼠膀胱重建术后,A、B两组与C组膀胱最大容量(Volmax)比较有极显著性差异(P<0.01),而A、B两组之间膀胱最大容量比较无显著性差异(P>0.05)。组织学观察,2 w时HAAM即已吸收降解,膀胱移行细胞和平滑肌细胞开始形成,A组吻合修补区较厚,平滑肌细胞规则且丰富。结论HAAM作为膀胱移植物进行膀胱修补吸收降解迅速,负载MSCs后构建的组织工程膀胱是理想的替代修补材料。