【摘 要】
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目的:克隆小鼠内皮抑素(endostatin)基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗大鼠C6脑胶质瘤.方法:采用RT PCR法,从小鼠肝组织克隆endostatin基因,重组入pUC19,测序
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军神经外科研究所
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目的:克隆小鼠内皮抑素(endostatin)基因,检测其表达蛋白的生物学活性,应用该蛋白治疗大鼠C6脑胶质瘤.方法:采用RT PCR法,从小鼠肝组织克隆endostatin基因,重组入pUC19,测序后构建非融合表达载体pBV220 endostatin,使其在DH5α内经温度诱导表达,纯化endostatin蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性,经荷C6胶质瘤大鼠皮下注射该蛋白,检测其抑瘤效应.结果:所获得的endostatin基因测序正确,其诱导表达蛋白分子量为20kDa,具有抗血管生成活性;应用该蛋白可抑制荷瘤大鼠C6脑胶质瘤生长.结论:小鼠endostatin基因的成功克隆、表达及应用,为抗血管生成治疗实体瘤研究奠定了实验基础.
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