Cx酶酶活力表征方法的改进

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Cx酶酶活力的传统测定方法由于底物羧甲基纤维素钠(CMC-Na)浓度低、粘度大且是变量等原因造成了较大的系统误差.本研究是在不同底物浓度下测定了康宁木霉AS3.4262表达的Cx酶酶活力,并对结果进行了多项式回归,测算出不同底物浓度下反应的初速度,求得米氏常数(Km)和最大反应速率(vmax)值.研究发现传统测定方法使用的底物浓度与Km在一个数量级上,难以合理测定酶活性,而底物物性限制了底物浓度提高.作者采用多项式回归测定vmax来表征酶活力,优点是结果不受检测过程中底物浓度变化的影响.
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