结肠癌单抗MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段的制备

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背景与目的:MC5是一种特异性良好的针对人结肠癌的鼠源性单克隆抗体,而将鼠源性抗体小型化可使其用于在体研究时引起人抗鼠抗体反应的可能性大大降低.本研究的目的是制备MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段(ScFv).方法:从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RTPCR分别扩增抗体的重、轻链可变区DNA(VH和VLDNA),两者经linkerDNA连接形成ScFvDNA.将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7辅助噬菌体感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv.以高表
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