MAGE-3目的基因原核表达载体的构建和表达

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目的构建原核表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达,为制备以黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)基因片段为基础的肽疫苗及特异诊断试剂提供抗原打下基础。方法通过逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)法制备MAGE-3目的基因,以pGEM—T Easy为克隆载体,DGEX-4T-1为原核表达载体,将MAGE-3目的基因克隆至pGEM—TEasy载体和亚克隆至pGEX-4T-1载体上。筛选、鉴定阳性克隆并将其转化E.coli BL21.经IPTG诱导,12%SDS—
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