猪脑心肌炎病毒非结构蛋白3AB基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定

来源 :畜牧与兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：angwjif

【摘要】

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利用PCR方法扩增获得EMCV非结构蛋白3AB基因，并将其克隆至杆状病毒转座载体pFastBac^TM中，提取阳性克隆质粒转化至DH10Bac感受态细菌，通过蓝白斑筛选和PCR鉴定，得到重组杆状病毒

【作者】

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沈芳李玉峰王先炜李军星王海燕姜平

【机构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

【出处】

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畜牧与兽医

【发表日期】

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2009年2期

【关键词】

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脑心肌炎病毒非结构蛋白3AB基因杆状病毒表达 Encephalomyocarditis virus （EMCV） 3AB gene baculoviru

【基金项目】

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教育部重点项目（104101）,国家“863”项目（2006AA10A203）.

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利用PCR方法扩增获得EMCV非结构蛋白3AB基因，并将其克隆至杆状病毒转座载体pFastBac^TM中，提取阳性克隆质粒转化至DH10Bac感受态细菌，通过蓝白斑筛选和PCR鉴定，得到重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-3AB，经脂质体介导转染sf9细胞获得重组杆状病毒，并IFA和Westernblotting鉴定其抗原性。结果表明，EMCV3AB基因在昆虫细胞中获得成功表达，分子量约16ku，具有良好的EMCV抗原性。因此利用杆状病毒表达系统成功表达了EMCV3AB基因，为该病毒抗原表位和诊断方法研究奠

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