【摘 要】
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背景:前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失导致年龄相关心肌病,但细胞衰老在此过程中的作用尚不清楚.目的:研究Uvrag基因缺失对心脏细胞衰老的影响.方法:从Uvrag基因缺失纯合
【机 构】
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上海交通大学Bio-X研究院,遗传发育与精神神经疾病教育部重点实验室,上海市200240
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背景:前期工作发现自噬相关基因Uvrag缺失导致年龄相关心肌病,但细胞衰老在此过程中的作用尚不清楚.目的:研究Uvrag基因缺失对心脏细胞衰老的影响.方法:从Uvrag基因缺失纯合子小鼠和野生型小鼠中各取14只雄性小鼠分两批分别饲养到3月龄和8月龄.采用real time RT-PCR检测小鼠心脏组织衰老相关分泌表型相关因子mRNA表达变化,苏木精-伊红染色、天狼猩红染色、衰老相关β-半乳糖苷酶染色进行心肌组织学观察,透射电镜观察小鼠心肌细胞超微结构的变化,蛋白免疫印迹检测小鼠心脏组织p53蛋白表达量.实验方案经上海交通大学动物实验伦理委员会批准.结果 与结论:①苏木精-伊红染色和天狼猩红染色结果显示,Uvrag基因缺失导致单个心肌细胞显著增大及心脏纤维化;②透射电镜显示,Uvrag基因缺失小鼠心肌细胞线粒体形态异常、排列紊乱,肌浆网肿胀;③衰老相关β-半乳糖苷酶染色发现,Uvrag基因缺失小鼠心脏衰老细胞显著增多;④real time RT-PCR结果表明,Uvrag基因缺失小鼠心脏衰老相关分泌表型因子表达显著上调;⑤Western blot结果显示Uvrag基因缺失导致心脏组织衰老调控关键蛋白p53表达显著升高;⑥结果说明,自噬相关基因Uvrag缺失促进小鼠心脏细胞衰老;Uvrag基因是潜在的延缓心脏衰老及抗衰老相关心脏疾病的靶分子.
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