论文部分内容阅读
【摘 要】 目的：建立测定硫酸鱼精蛋白中镉含量的测定方法。方法：采用石墨炉原子吸收光谱法，供试品经微波消解处理后测定， 镉测定波长228.8nm，狭缝0.7nm，光源灯电流8MA，结果：镉浓度在线性范围0～2ng/ml范围内与吸光度呈良好线性关系， 平均加样回收率为 98.7%（RSD=1.1%，n=9）。结论：方法准确快捷、专属性强，检出限低，精密度高，回收率好，线性范围宽，稳定性好。
【关键词】 硫酸鱼精蛋白 石墨炉原子吸收分光光度法 镉 微波消解
硫酸鱼精蛋白系鱼类新鲜成熟精子中摄取的一种碱性蛋白质硫酸盐[1]，其具有的强碱性基团在体内可与强酸性的肝素结合，从而使肝素失去抗凝能力。现在，水污染等环境问题日益突出，工业废水中大量重金属进入水体后极易在鱼类等生物体内产生富集，而硫酸鱼精蛋白系通过鱼类分泌物提取获得，因此临床用药时存在将重金属传递人体的风险，控制原料药中重金属就很重要。中国药典2010年版二部采用目视比色法对其重金属进行检查。本文采用微波消解-石墨炉原子吸收光谱法测定硫酸鱼精蛋白中镉的新方法，方法准确、简单、灵敏[2]。
1 仪器与试药
AA-7000型原子吸收分光光度计（日本岛津公司），MAS-6微波消解仪（美国CEM公司），标准镉溶液1000 μg/ml（国家标准物质研究中心），硫酸鱼精蛋白（上海生化药业有限公司，批号：140205，140308，140520），硝酸（优级纯）。
2 方法与结果
2.1 标准储备液制备
精密量取镉标准液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇均，精密量取1ml，置200ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 标准溶液的制备
精密量取2.1项的标准储备液0.4，1，2，3，4ml分别置100ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为浓度为0.2，0.5，1.0，1.5，2.0ng/ml.标准溶液，以1%硝酸溶液作为空白溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取硫酸鱼精蛋白样品约0.2g，精密称定，置消解罐中，加硝酸5ml，，密塞，置微波消解仪内进行消解处理[，3]，微波功率800W，5分钟升温至120℃，保持5分钟，2分钟升温至140℃，保持10分钟，3分钟升温至190℃，保持15分钟。消解完毕，待冷却后取出，用水将内容物转移至100ml量瓶中，用水洗涤消解罐，洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。另取硝酸5ml，按上述操作同时制备空白溶液。
2.4 测定条件和方法
采用高温分解涂层石墨管，测定波长228.8nm，狭缝0.7nm，光源灯电流8MA，石墨炉程序升温条件[1]：干燥温度120℃，20s，灰化温度350℃，20s，原子化温度2000℃，5s。
2.5 方法学考察
2.5.1 线性试验
精密量取2.1项下标准储备液0，0.4，1.0，1.6，2.0，2.4ml，分别置100ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为标准曲线溶液，每个浓度平行测定3份，分别测定，取吸收度平均值，以质量浓度C为横坐标，吸收度A为纵坐标进行线性回归，回归方程为：A=0.06268C+0.00865，r=0.9995，线性范围0～2ng/ml。
2.5.2 加样回收试验
取硫酸鱼精蛋白样品9份，每份约0.2g，精密称定，分别置消解罐中，加硝酸5ml，每3份分别精密加入2.1项下标准储备液1.0，2.0，3.0ml，混匀，按2.3项下方法，同法制备加样试验，分别按2.4项下方法测定，计算回收率，结果见下表1。
2.5.3 样品测定和重复性试验
按2.4项下方法的测定，分别对三批样品测定，结果均未检出镉。
取硫酸鱼精蛋白样品6份，每份约0.2g，精密称定，分别置消解罐内，精密加入2.1项下标准储备液2.0ml，按2.3项方法制备加样溶液，分别按2.4项下方法测定，计算加样回收率，测得回收率的RSD（n=6）为1.2%，结果表明方法的重复性良好。
2.5.4 精密度试验
分别取标准溶液0.5ng/ml，1.5ng/ml， 连续测定6次，按2.4项下方法测定吸光度，RSD分别为1.8%，1.5%，结果表明方法的精密度良好。
2.5.5 检测限
取供试品空白溶液，连续进样20次，按2.4项下方法测定，由吸收度标准偏差的3倍和标准曲线的斜率计算镉的最低检测浓度，为0.052ng/ml，按供试品的称量和稀释步骤，计算方法的检测限为0.03ug/g。
3 讨论
3.1 样品的处理
硫酸鱼精蛋白在水中易溶，其水溶液直接进样时，蛋白质等有机物对测定有干扰，因此改用微波消解法进行处理，可獲得澄清溶液，微波消解具有快速高效，耗酸少和空白值低等特点。
3.2 石墨管的确定
普通石墨管表面空隙高，多次使用后表面变化大，样品易渗入，原子化效率低，同时有记忆效应，而高温分解涂层石墨管表面光滑致密，样品不易渗入，记忆效应低，灵敏度大大提高。
3.3 结论
采用石墨炉原子吸收光谱法测定硫酸鱼精蛋白中镉含量，方法准确，专属性强，灵敏度高，检出限低，回收率高。
参考文献
[1]2010年版中国药典（二部）[S].2010：989
[2]曹珺，原子吸收光谱法测定食品中重金属含量的研究[J].（食品科学），2012，33（7）：304
[3]沈梅，微波消化在药品微量元素测定中的应用[J].（中国测试技术），2007，33（4）：123
【关键词】 硫酸鱼精蛋白 石墨炉原子吸收分光光度法 镉 微波消解
硫酸鱼精蛋白系鱼类新鲜成熟精子中摄取的一种碱性蛋白质硫酸盐[1]，其具有的强碱性基团在体内可与强酸性的肝素结合，从而使肝素失去抗凝能力。现在，水污染等环境问题日益突出，工业废水中大量重金属进入水体后极易在鱼类等生物体内产生富集，而硫酸鱼精蛋白系通过鱼类分泌物提取获得，因此临床用药时存在将重金属传递人体的风险，控制原料药中重金属就很重要。中国药典2010年版二部采用目视比色法对其重金属进行检查。本文采用微波消解-石墨炉原子吸收光谱法测定硫酸鱼精蛋白中镉的新方法，方法准确、简单、灵敏[2]。
1 仪器与试药
AA-7000型原子吸收分光光度计（日本岛津公司），MAS-6微波消解仪（美国CEM公司），标准镉溶液1000 μg/ml（国家标准物质研究中心），硫酸鱼精蛋白（上海生化药业有限公司，批号：140205，140308，140520），硝酸（优级纯）。
2 方法与结果
2.1 标准储备液制备
精密量取镉标准液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇均，精密量取1ml，置200ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
2.2 标准溶液的制备
精密量取2.1项的标准储备液0.4，1，2，3，4ml分别置100ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为浓度为0.2，0.5，1.0，1.5，2.0ng/ml.标准溶液，以1%硝酸溶液作为空白溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取硫酸鱼精蛋白样品约0.2g，精密称定，置消解罐中，加硝酸5ml，，密塞，置微波消解仪内进行消解处理[，3]，微波功率800W，5分钟升温至120℃，保持5分钟，2分钟升温至140℃，保持10分钟，3分钟升温至190℃，保持15分钟。消解完毕，待冷却后取出，用水将内容物转移至100ml量瓶中，用水洗涤消解罐，洗液转移至量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。另取硝酸5ml，按上述操作同时制备空白溶液。
2.4 测定条件和方法
采用高温分解涂层石墨管，测定波长228.8nm，狭缝0.7nm，光源灯电流8MA，石墨炉程序升温条件[1]：干燥温度120℃，20s，灰化温度350℃，20s，原子化温度2000℃，5s。
2.5 方法学考察
2.5.1 线性试验
精密量取2.1项下标准储备液0，0.4，1.0，1.6，2.0，2.4ml，分别置100ml量瓶中，用1%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为标准曲线溶液，每个浓度平行测定3份，分别测定，取吸收度平均值，以质量浓度C为横坐标，吸收度A为纵坐标进行线性回归，回归方程为：A=0.06268C+0.00865，r=0.9995，线性范围0～2ng/ml。
2.5.2 加样回收试验
取硫酸鱼精蛋白样品9份，每份约0.2g，精密称定，分别置消解罐中，加硝酸5ml，每3份分别精密加入2.1项下标准储备液1.0，2.0，3.0ml，混匀，按2.3项下方法，同法制备加样试验，分别按2.4项下方法测定，计算回收率，结果见下表1。
2.5.3 样品测定和重复性试验
按2.4项下方法的测定，分别对三批样品测定，结果均未检出镉。
取硫酸鱼精蛋白样品6份，每份约0.2g，精密称定，分别置消解罐内，精密加入2.1项下标准储备液2.0ml，按2.3项方法制备加样溶液，分别按2.4项下方法测定，计算加样回收率，测得回收率的RSD（n=6）为1.2%，结果表明方法的重复性良好。
2.5.4 精密度试验
分别取标准溶液0.5ng/ml，1.5ng/ml， 连续测定6次，按2.4项下方法测定吸光度，RSD分别为1.8%，1.5%，结果表明方法的精密度良好。
2.5.5 检测限
取供试品空白溶液，连续进样20次，按2.4项下方法测定，由吸收度标准偏差的3倍和标准曲线的斜率计算镉的最低检测浓度，为0.052ng/ml，按供试品的称量和稀释步骤，计算方法的检测限为0.03ug/g。
3 讨论
3.1 样品的处理
硫酸鱼精蛋白在水中易溶，其水溶液直接进样时，蛋白质等有机物对测定有干扰，因此改用微波消解法进行处理，可獲得澄清溶液，微波消解具有快速高效，耗酸少和空白值低等特点。
3.2 石墨管的确定
普通石墨管表面空隙高，多次使用后表面变化大，样品易渗入，原子化效率低，同时有记忆效应，而高温分解涂层石墨管表面光滑致密，样品不易渗入，记忆效应低，灵敏度大大提高。
3.3 结论
采用石墨炉原子吸收光谱法测定硫酸鱼精蛋白中镉含量，方法准确，专属性强，灵敏度高，检出限低，回收率高。
参考文献
[1]2010年版中国药典（二部）[S].2010：989
[2]曹珺，原子吸收光谱法测定食品中重金属含量的研究[J].（食品科学），2012，33（7）：304
[3]沈梅，微波消化在药品微量元素测定中的应用[J].（中国测试技术），2007，33（4）：123