【摘 要】
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由干扰素诱导细胞产生的GTP蛋白酶M（IRGMs）在抵御病原微生物中发挥着核心作用。为建立IRGMs基因缺失的MDCK细胞系,本研究利用CRISPR/Cas9技术根据MDCK中IRGM4、IRGM5和IRGM6的
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所-美国密歇根州立大学天然免疫联合实验室兽医生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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基金项目：中国农业科学院创新工程经费
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由干扰素诱导细胞产生的GTP蛋白酶M（IRGMs）在抵御病原微生物中发挥着核心作用。为建立IRGMs基因缺失的MDCK细胞系,本研究利用CRISPR/Cas9技术根据MDCK中IRGM4、IRGM5和IRGM6的基因序列设计并合成正链和负链引导RNA（g RNA）的靶DNA序列,以本实验室构建的含有单链引导RNA（sg RNA）骨架转录序列的通用质粒（p Gen-sg RNA）为模板,将U6启动子与合成的相关基因g RNA靶序列经PCR融合扩增,其产物再与sg RNA的骨架转录序列进行重叠延伸PCR扩增,
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