角鲨烯合成酶特异性mU6-siRNA真核表达载体的构建及鉴定

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gggmtdh2009

【摘要】

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利用RNA干扰技术靶向构建角鲨烯合成酶基因ERG9特异性真核表达载体。将针对粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe Linder）ERG9不同部位所设计的3对siRNA序列通过重组技术克

【作者】

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李文进袁其朋李晔程冰

【机构】

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北京化工大学生命科学与技术学院

【出处】

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生物技术通报

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

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角鲨烯合成酶 RNA干扰 ERG9 辅酶Q10 Squalene synthetase RNAi CoQ10 ERG9

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（No.20576010）

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利用RNA干扰技术靶向构建角鲨烯合成酶基因ERG9特异性真核表达载体。将针对粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe Linder）ERG9不同部位所设计的3对siRNA序列通过重组技术克隆到质粒mU6 pro中构建真核表达重组体mU6 ERG9 siRNA1、2、3,转化DH5α菌株扩增,提取质粒通过限制性酶切和测序分析对重组表达载体进行鉴定,分析结果表明3个表达载体的设计基因插入正确,成功构建了ERG9特异性真核表达载体mU6 ERG9 siRNA,重组体的成功构建为在裂殖酵母

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