促红细胞生成素受体干扰RNA慢病毒表达载体的构建及干扰细胞的筛选

来源 :中华危重症医学杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:pppxulan
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目的构建人促红细胞生成素受体(EPOR)干扰RNA慢病毒(LV)表达载体,并筛选出EPOR能稳定干扰人脑胶质细胞瘤U251细胞的最佳感染复数(MOI)。方法构建人EPOR干扰RNA慢病毒表达载体,即LV-EPOR,收集病毒,检测病毒滴度后感染人脑胶质细胞瘤U251细胞(LV-EPOR-U251细胞),根据MOI值的不同分为MOI_(100)、MOI_(10)、MOI_1组,选出荧光表达量最高的一组,经RT-PCR检测m RNA表达,计算干扰效率。结果将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功
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