【摘 要】
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采用酶消化法分离鸡胚原始生殖细胞(PGCs),纯化后进行体外培养,传至5~6代时,通过对阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)免疫荧光标记、碱性磷酸酶检测等方法联合鉴定其基本生物学特性,同
【机 构】
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扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物繁育与分子设计重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30871791),江苏省研究生培养科研创新计划项目(2010-05),江苏省“六大人才高峰”项目(NY201001),江苏省高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230001),高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20103250110006)
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采用酶消化法分离鸡胚原始生殖细胞(PGCs),纯化后进行体外培养,传至5~6代时,通过对阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)免疫荧光标记、碱性磷酸酶检测等方法联合鉴定其基本生物学特性,同时以RT-PCR方法检测其特异基因的表达。结果表明:体外培养的PGCs维持未分化状态,碱性磷酸酶阳性、免疫荧光检测其特异标志物SSEA-1阳性。鸡胚PGCs表达减数分裂前标志基因Dazl、Nanog和GDF3,生殖细胞分化后期基因CVH,原始生殖细胞标志基因Blimp-1以及干细胞多能性相关基因Oct-4,不表达减数分裂
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