欧洲山杨一号染色体显微分离、原位杂交分析及特异文库的构建

来源 :园艺学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：m116730647

【摘要】

：

以欧洲山杨（Populus tremula）根尖细胞为材料，采用玻璃针分离法，通过显微操作器成功地分离出一号染色体。将分离到的单条染色体去蛋白、Sau3A酶切，并在染色体DNA片段两端加上Sau3A

【作者】

：

张守攻张勇刘博李秀兰宋文芹韩素英齐力旺

【机构】

：

中国林业科学院林业研究所细胞生物学实验室,南开大学生命科学学院

【出处】

：

园艺学报

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

：

欧洲山杨染色体显微分离特异性文库荧光原位杂交 Populus tremula Chromosome Microdissection Chro

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以欧洲山杨（Populus tremula）根尖细胞为材料，采用玻璃针分离法，通过显微操作器成功地分离出一号染色体。将分离到的单条染色体去蛋白、Sau3A酶切，并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头，进行两轮PCR扩增，得到了200～3000bp的DNA扩增片段。以DIG-dUTP标记的欧洲山杨基因组DNA为探针进行Southern杂交，结果表明显微分离出的染色体扩增片段与欧洲山杨基因组DNA同源，从而证明一号染色体DNA确实已被成功地扩增。以一号染色体第2轮PCR产物为探针进行荧光原位杂交，发现

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