【摘 要】
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目的:研究LINC00680对胃癌细胞增殖、上皮间充质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)和人胃黏膜上皮永生细胞系GES1中LINC00680和miR-431-5p表达水平.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定LINC00680对miR-431-5p的调控作用.采用脂质体转染法将si-NC、si-LINC00680、miR-NC、miR-431-5p mimics、si-LINC00680+an
【机 构】
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中国人民解放军联勤保障部队第九二八医院消化内科,海口570206
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目的:研究LINC00680对胃癌细胞增殖、上皮间充质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)和人胃黏膜上皮永生细胞系GES1中LINC00680和miR-431-5p表达水平.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定LINC00680对miR-431-5p的调控作用.采用脂质体转染法将si-NC、si-LINC00680、miR-NC、miR-431-5p mimics、si-LINC00680+anti-miR-NC、si-LINC00680+anti-miR-431-5p分别转染AGS细胞.细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP2)、MMP9、上皮细胞钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经钙黏素(N-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达.结果:与GES1比较,胃癌细胞系中LINC00680表达水平显著升高,miR-431-5p表达显著降低(P<0.05).LINC00680靶向负调控miR-431-5p表达.抑制LINC00680或过表达miR-431-5p均可显著降低AGS细胞的增殖、迁移和侵袭能力,降低CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白的表达水平,且抑制miR-431-5p表达可逆转si-LINC00680对AGS增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05).抑制LINC00680可显著降低AGS细胞N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平,增加E-Cadherin蛋白表达水平,且抑制miR-431-5p表达可逆转si-LINC00680对AGS细胞E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin表达的影响(P<0.05).结论:抑制LINC00680表达可降低胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制EMT进程,其机制与靶向调控miR-431-5p表达有关.
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