新载体pET-DB对带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的高效表达与纯化

来源 :生物化学与生物物理进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：test1987

【摘要】

：

报道了带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达,SDS-PAGE分析表明,带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的

【作者】

：

朱志勇谭波张文河张洪杰

【机构】

：

北京师范大学生物化学与分子生物学系,中国科学院生物物理研究所

【出处】

：

生物化学与生物物理进展

【发表日期】

：

2004年7期

【关键词】

：

蛋白质表达二氢叶酸还原酶 pET—DB载体 His—tag protein expression dihydrofolate reductase pET-DB

【基金项目】

：

教育部留学回国人员科研启动基金，中国科学院所长基金

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报道了带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达,SDS-PAGE分析表明,带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的含量可占大肠杆菌细胞总蛋白质含量的46%.该酶的纯化可用常规的金属络合树脂一步纯化至SDS-PAGE一条带,经凝血酶切去His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶与用等电聚焦法获得的无His-tag的酶有相同的酶活性.

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