【摘 要】
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为制备恙虫病东方体SJ_(2)株基因重组抗原和恙虫病血清学诊断备选抗原,根据恙虫病东方体56 kDa外膜蛋白基因序列设计特异性引物,经PCR扩增东方体SJ_(2)株56 kDa型蛋白羧基端
【机 构】
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南京工业大学食品与轻工学院,东部战区疾病预防控制中心
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81472932),江苏省自然科学基金(BK20170998),国家科技重大专项子课题(2018ZX10713003、2017ZX10303401),军队后勤重大项目(AWS16J020)
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为制备恙虫病东方体SJ_(2)株基因重组抗原和恙虫病血清学诊断备选抗原,根据恙虫病东方体56 kDa外膜蛋白基因序列设计特异性引物,经PCR扩增东方体SJ_(2)株56 kDa型蛋白羧基端部分基因,序列测定并用软件Bioedit与我国主要东方体流行株56kDa蛋白进行氨基酸序列比对分析。然后克隆至载体pET-28a并在BL21菌体中诱导表达,通过His镍柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western-blot鉴定分析。结果显示,成功扩增出恙虫病东方体SJ_(2)株56 kDa蛋白708 bp基因片段,氨
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