【摘 要】
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用PCR方法从pROK.TG1LK扩增得到γ-zein基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,获得了重组质粒pMD18-γ-zein,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBI
【机 构】
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四川省草原科学研究院,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
【基金项目】
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国家十二五科技支撑计划(2011BAD17B03), 四川省应用基础项目(2008JY0010), 四川省科技厅十一五牧草育种攻关(06SG023-001), 国家牧草产业技术体系阿坝综合试验站共同资助
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用PCR方法从pROK.TG1LK扩增得到γ-zein基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,获得了重组质粒pMD18-γ-zein,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI1302载体,经回收、连接、转化、鉴定后,构建了由35S驱动的绿色荧光蛋白(GFP)融合的植物表达载体pCB-GFP-γ-zein,用基因枪法将GFP-γ-zein基因整合到洋葱表皮细胞中,通过共聚焦显微镜观察,该融合基因在洋葱表皮细胞的细胞壁、细胞核和细胞质中得到了表达。
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