利用虾蟹壳制备氨糖的研究

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  甲壳素是一类高分子聚合物,由于其不溶于水的特点,故而限制了它的应用和发展。但是经过水解处理后的甲壳素,可以制备出氨糖,而氨糖则被广泛应用于关节炎和骨质增生等诸多疾病的防治,在现代医学中具有不可替代的重要作用。甲壳素主要来源于虾蟹壳中,目前我国的废置虾蟹壳数量巨大,通过高温水解工艺使得虾蟹壳资源可以得到有效地开发利用,是对可持续发展的有力支持。
  试剂和仪器
  试剂。活性炭;甲壳素;其余材料都是分析纯。
  主要仪器。鼓风干燥箱101-2A(上海特成机械设备有限公司)、真空冷冻干燥机JY7112 (奉化市溪口永磁微型电机厂)。
  实验方法
  甲壳素的制备。对蟹壳进行酸碱循环处理,碳酸钙通过5%盐酸浸泡23h进行分解去除,蛋白质通过3%氢氧化钠加热5h去除,最后通过双氧水氧化脱色,得到甲壳素。
  氨糖粗品的制备。向提取得到的甲壳素中加入盐酸,同时进行持续升温,并把其余的甲壳素分批次陆续放入,通过使用恒温水浴锅控制温度在55℃,处理28min,然后进行105℃高温水解4.6 h。最后真空抽干,氨糖粗品制备完成。
  氨糖粗品的纯化。取制备的氨糖粗品,并放置于热水进行溶解,然后加入活性炭,趁温度较高进行过滤,通过热水过滤残渣。80℃加热直至有结晶出现,放入浓度为95%酒精,数小时以后,过滤得到晶体,氨糖纯化完成。
  结果分析
  水解时间。使用盐酸对甲壳素进行水解,水解时间通过水解的程度来控制。经水解反应,最终产物为氨糖,本次测定取甲壳素55g,30 %盐酸190ml,水解温度105℃,由图1得出,水解时间越长,所得到的氨糖量也越大,但超过4.6h以后,其量不再增加,说明在一定的水解时间内该反应过程是一个递增函数,达到4.6h时,甲壳素彻底水解,此时无需再增加水解时间,因此最佳的水解时间为4.6h。
  盐酸用量。氨糖制备中,盐酸促进水解反应,也是甲壳素的分散剂,如果盐酸的量较少,则溶剂粘度增大,致使溶合不均匀,不利于甲壳素的水解,而且盐酸用量少会降低氨糖的产率。所以盐酸的量直接影响着氨糖的产量。取甲壳素55g,浓度为30 %的盐酸,水解温度108℃,结果如图2所示,盐酸的量在190ml时,氨糖的产率随盐酸用量的增加逐渐增高,在超过190ml以后,氨糖产率增长曲线趋于缓和,增速缓慢。所以确定盐酸的最佳用量为190ml。
  加料方式。盐酸本身不能将甲壳素溶解,但可以把甲壳素分散开,便于水解反应发生。从实验过程可以看出,甲壳素中加入一定量的盐酸,立即升温,促进水解,溶液的颜色逐渐加深,此现象不利于产物的脱色和氨糖的制备。由于盐酸具有腐蚀作用,水解反应所得产物在盐酸环境中脱水碳化,引起颜色变化。将甲壳素分批次加入到热的盐酸中,温度控制在55℃,28min,等反应溶剂充分混合,变为糊状后,开始升温,水解速度加快。实验发现,按此法操作,其水解液颜色相对较浅,碳化程度较低,该加料方式比较合理。
  脱色条件的影响。甲壳素高温水解反应过程中,所得产物发生脱水碳化反应,从而导致色素堆积,所以反应产物需要作脱色处理,通过活性炭进行脱色处理的水解产物,实验结果表明,其脱色效果受到活性炭用量的影响,同时也和脱色所用时间直接相关。当ph值为2,温度80℃,结果如表1,脱色时间为1.8h,活性炭的用量为4.8%时,脱色效果最好。
  结晶条件的确定。水解所得氨糖粗品,需要进一步过滤结晶处理,所用试剂为乙醇。从图3可见,乙醇用量达到55ml之前,随着乙醇试剂用量的增大,氨糖产物的产率随之增大,在55ml以后,虽然产率也在增加,但增长不明显,因此55ml为结晶的临界值,即是氨糖结晶乙醇用量的最佳值。
  产品产率及纯度。对上述已经确定的高温水解参数进行可行性分析,通过选取以上的最佳参数进行优化,实验结果详见表2,氨糖的平均得率79.5% ,产品纯度98.4%。
  用本工艺制备氨基葡萄糖是可行的。将55g甲壳素分批次加入到190ml盐酸中,55℃保温处理28min,然后进行105℃高温水解4.6h,加4.8%活性炭,脱色时间为1.8h,得到氨糖粗品。取50ml 10%的氨糖粗品溶液,加入55ml 浓度为95%的乙醇,结晶得氨糖。
  (作者单位:山东荣成威海海洋职业学院;山东荣成宏伟食品有限公司)
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