【摘 要】
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目的明确结直肠癌(CRC)患者的血清外泌体中miRNA表达谱的差别,以寻找其在结直肠癌患者早期诊断中的价值。方法通过外泌体提取试剂盒抽提3例CRC患者及健康对照者外周血清外泌
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目的明确结直肠癌(CRC)患者的血清外泌体中miRNA表达谱的差别,以寻找其在结直肠癌患者早期诊断中的价值。方法通过外泌体提取试剂盒抽提3例CRC患者及健康对照者外周血清外泌体,利用电镜进行验证,并抽提总RNA逆转录,利用384条miRNA定量检测试剂盒初步筛选差异miRNA,再通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法验证剩余23例患者及对照中筛选的差异miRNA;并通过ROC曲线鉴别CRC患者特征性表达外泌体miRNA鉴别CRC患者和健康对照者的诊断效能。结果透射电镜观察抽提的血清外泌体形态符合外泌体的特征;miRNA定量PCR芯片筛选出7条有差异的CRC血清外泌体miRNA,其中3条miRNA(miR-204、miR-23C、miR-615)表达显著上调,而4条miRNA(miR-675、miR-125b、miR-230、miR-1252)表达明显下调,并且通过定量PCR验证和筛选结果一致;将7条特异性的miRNAs进行聚类分析,可将CRC患者与健康对照者明显区分开来,ROC曲线分析,CRC患者的曲线下面积(AUC)可达0.826(95%CI:0.724-0.929)(P<0.001)。结论血清外泌体来源的miR-204等7条miRNAs可作为早期鉴别诊断结直肠癌患者的一类新型候选肿瘤标志物。
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