副溶血弧菌耐热直接溶血毒素基因的克隆及原核表达

来源 :上海海洋大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jpflxy

【摘要】

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根据GenBank上已有的副溶血弧菌耐热直接溶血毒素的基因序列，设计并人工合成引物。将耐热直接溶血毒素的基因全长克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1上，构建重组表达载体tdhA／pGEX

【作者】

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丁莹潘迎捷赵勇孙晓红金维荣徐晓晶秦红友

【机构】

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上海海洋大学食品学院,上海生物芯片有限公司

【出处】

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上海海洋大学学报

【发表日期】

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2009年3期

【关键词】

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副溶血弧菌耐热直接溶血毒素克隆纯化蛋白 Vibrio parahaemolyticus thermostable direct hemolysin

【基金项目】

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基金项目：上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字2006第10-5号）

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根据GenBank上已有的副溶血弧菌耐热直接溶血毒素的基因序列，设计并人工合成引物。将耐热直接溶血毒素的基因全长克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1上，构建重组表达载体tdhA／pGEX-4T-1和tdhS／pGEX-4T-1，转化大肠杆菌BL21（DE3），得到表达的工程菌株。优化诱导表达条件，表达耐热直接溶血毒素。转化有重组质粒tdhA／pGEX-4T-1，tdhS／pGEX-4T-1的BL21可稳定高效地表达可溶形式的目的蛋白。表达产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，用GST琼脂糖珠柱亲和层析纯化。溶

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