转基因油菜地高辛标记DNA探针杂交检测方法的建立

来源 :口岸卫生控制 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cliff800

【摘要】

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通过PCR扩增法制备转基因油菜外源筛选基因FMV35S启动子的DIG-11-dUTP标记DNA探针,与该基因PCR扩增产物进行Southern杂交,通过显色反应对商品化转基因油菜进行检测.本研究对

【作者】

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刘烜郑文杰赵卫东贺艳唐丹舟刘辉

【机构】

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天津出入境检验检疫局

【出处】

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口岸卫生控制

【发表日期】

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2005年4期

【关键词】

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杂交 PCR 转基因油菜地高辛标记探针杂交检测 DNA探针地高辛标记 DIG-11-dUTP SOUTHERN杂交硝酸纤维素膜 Hybridizatio

【基金项目】

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天津市科委科研项目

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通过PCR扩增法制备转基因油菜外源筛选基因FMV35S启动子的DIG-11-dUTP标记DNA探针,与该基因PCR扩增产物进行Southern杂交,通过显色反应对商品化转基因油菜进行检测.本研究对反应基片带正电荷的尼龙膜和硝酸纤维素膜进行了比较,并比较了不同固定条件和杂交条件下的杂交结果.尼龙膜较之硝酸纤维素膜可更好的结合DNA片段,经紫外线照射交联5分钟,与含甲酰胺的杂交液在45℃杂交30 min结果较为理想.

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