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目的 构建hITF毕赤酵母分泌型表达载体，表达重组hITF，为功能研究奠定基础。方法 通过PCR获得hITFcDNA片段，将目的基因插入酵母表达载体pGAPZαA分泌信号下游，得到重组载体pGAPZαA-hITF。BspH Ⅰ线性化后氯化锂转化进入X-33，Zeocin筛选转化酵母菌，PCR鉴定目的基因。阳性转化子经摇瓶表达，取上清TCA沉淀后做Tricine SDS-PAGE分析及Western blot检测。结果 经测序及PCR证实，hITFcDNA准确插入酵母表达载体pGAPZαA中，氯化锂转化后，