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目的 应用基因工程技术获取足量且具有免疫活性的IA-2重组蛋白，为建立IA-2抗体检测方法奠定基础。方法 通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA-2胞内结构域的cDNA，构建表达型重组质粒，经DNA序列分析确证后，在大肠杆菌中表达，用亲和层析纯化融合目的蛋白，并以斑点印迹技术(Dot blot)鉴定其免疫原性。结果 所获特异PCR产物正确重组至Pinpoint Xa-1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约56 000的融合目的蛋白，表达量约1 mg蛋白/升菌液，且表达产物与谷 氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血 清发生的显色反应差异有显著性(P＜0.05)。结论 原核表达的IA-2融合蛋白具有免疫学活性，可用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。