利用分子印迹技术与铜离子(Cu²⁺)配位单元为双重识别模式,使用层层自组装先将L-半胱氨酸（L-cys）通过AuS键组装到石墨烯（rGO）和金纳米粒子（AuNPs）修饰的玻碳电极表面,再将Cu-凝血酶（THR）络合物通过L-cys与Cu²⁺配位作用组装到电极表面,以硫堇（Tn）为聚合单体,使用电聚合法聚合得到分子印迹膜,制备了具有双重识别模式的金属离子配体-分子印迹电化学传感器。采用扫描电镜（SEM）和能谱色散仪（EDS）对复合纳米材料进行表征。利用循环伏安法（CV）、交流阻抗法（EIS）和差分脉冲伏安法（DPV）对传感器性能进行了研究,在最佳检测条件下,传感器响应与THR浓度在2.0×10^-9～5.0×10^-7 g/L范围内呈良好的线性关系,线性方程为-ΔI（μA）=17.73+1.84 lgc（g/L）。构建了THR分子印迹电化学传感器的动力学吸附模型,测得印迹传感器的印迹因子β=4.32,结合速率常数k=5.68 s。传感器表现出良好的稳定性和重现性,可用于实际样品中凝血酶的检测。