5-杂氮-2'-脱氧胞苷对三阴性乳腺癌细胞肺转移的抑制作用

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目的 探讨5-杂氮-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞实验性肺转移的影响及其机制.方法 将 MDA-MB-231细胞分对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量逆转录-聚合酶链反应(SqRT-PCR)与甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)基因的mRNA表达与启动子区甲基化状况.然后通过边缘尾静脉将2×105个细胞注射到每只BALB/C nu/nu裸鼠体内(每组5只),5周后,通过荧光定量RT-PCR(FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内目的基因HPRT mRNA丰度来确定癌细胞肺转移程度.结果 对照组与处理组细胞的BRMS1相对灰度值(IDV)分别为0与0.390±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化;CXCR4相对IDV分别为0.580±0.003与0.580±0.010,两组之间差异无统计学意义(P>0.05),CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变;接种对照组与处理组细胞的裸鼠肺脏HPRT、GAPDH的Ct值分别为:24.75±1.55、16.19±0.69与27.61±1.67、17.48±0.96,2-△△Ct=0.34,转移抑制率为66%,处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度低,转移的癌组织较少.结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活了肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,降低了TNBC MDA-MB-231细胞实验性肺转移的能力.
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