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背景:胆固醇可使体外培养的神经元自身突触数量增加,囊泡数量及递质释放效能亦明显增高.目的:建立大鼠脑海马组织中微量胆固醇的高效液相色谱检测方法,观察胆固醇在大鼠脑海马发育和成熟中的作用.设计:重复测量实验.材料:实验于2004-01/06在武汉大学人民医院神经科学研究室完成.选择健康雄性Wistar乳鼠(出生24 h内)、幼鼠(28～30 d,体质量40～60 g)和成鼠(90～100 d,体质量200～250 g)各10只.方法:大鼠在麻醉状态下断头取海马称重,制备匀浆,离心,过滤后采用美国安捷伦公司反相色谱柱(ZORBAX XDB C18 4.6*250 mm 5 μm,Agilent),以乙腈-异丙醇(4:1)为流动相;流速0.8 mL/min;检测波长208nm.VARIAN Prostar 325紫外检测器和美国VARIAN公司的LCWORKSTATION V6.2色谱数据处理系统检测和处理色谱数据,获得胆固醇色谱图.样品中胆固醇含量(mg/g)=10×0.996 5×样品中胆固醇的峰面积×标准胆固醇的含量(g/L)÷标准胆固醇的峰面积主要观察指标:①乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量与其色谱峰面积的关系.②乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量.结果:30只大鼠均进入结果分析.①胆固醇含量在0.132 3～2.647 2 g/L时与其色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 93).②乳鼠、幼鼠和成鼠脑海马胆固醇含量:3组样品的胆固醇含量分别为(2.92±0.03),(11.20±3.41),(12.91±1.25)mg/g,差别均有极显著性意义(P＜0.01).结论:用高效液相色谱法检测大鼠脑海马组织中的微量胆固醇灵敏,特异性好,且分析时间短.在大鼠发育过程中,脑海马中胆固醇含量渐增,说明胆固醇对大鼠脑海马结构、功能的发育和成熟可能发挥了关键性的作用.