【摘 要】
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弓形虫病作为一种食源性人兽共患寄生虫病，严重危害公共卫生安全以及畜牧业生产。本实验选取弓形虫微线体蛋白2（TgMIC2）作为新的诊断靶标，构建TgMIC2重组表达质粒，并利用大肠杆菌表达系统进行表达，通过亲和层析纯化后获得重组蛋白，Western Blot检测该蛋白的免疫反应性，棋盘法确定最佳抗原包被量和血清稀释度，优化反应条件后，成功建立基于重组MIC2蛋白的猫弓形虫病间接ELISA（iELIS
【机 构】
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扬州大学兽医学院比较医学研究院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
【基金项目】
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江苏省杰出青年基金（BK2019046）； 江苏高校优势学科建设工程资助项目；
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弓形虫病作为一种食源性人兽共患寄生虫病，严重危害公共卫生安全以及畜牧业生产。本实验选取弓形虫微线体蛋白2（TgMIC2）作为新的诊断靶标，构建TgMIC2重组表达质粒，并利用大肠杆菌表达系统进行表达，通过亲和层析纯化后获得重组蛋白，Western Blot检测该蛋白的免疫反应性，棋盘法确定最佳抗原包被量和血清稀释度，优化反应条件后，成功建立基于重组MIC2蛋白的猫弓形虫病间接ELISA（iELISA）方法，并通过重复性、敏感性、特异性实验评价该方法，并对田间样品进行检测。结果显示，抗原最佳包被量为0.5 μg/孔，血清稀释度为1:100，临界值为0.7130时，该方法的敏感性为81.25%，特异性为100%。批内与批间重复变异系数均低于或在10%左右，具有良好的重复性；与猫沙门氏菌和猫细小病毒阳性血清均无交叉反应，特异性好。使用MIC2-iELISA方法和弓形虫全裂解抗原（TLA）建立的iELISA方法检测扬州地区的48份田间猫血清样本，符合率为93.75%。本研究基于重组MIC2蛋白建立了一种新的间接ELISA方法，该方法可初步用于猫弓形虫病的诊断。
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