【摘 要】
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目的 提取鲟鱼软骨中II型胶原蛋白,并鉴定其结构.方法 选取鲟鱼软骨为提取对象,采用碱洗、酸泡法去除非胶原成分、矿物质、多糖等物质,再用胃蛋白酶酶解法、氯化钠盐析法、去
【机 构】
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浙江恒和食品有限公司, 舟山 316000;海力生集团有限公司, 舟山 316000;浙江海力生生物科技股份有限公司, 舟山 316000
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目的 提取鲟鱼软骨中II型胶原蛋白,并鉴定其结构.方法 选取鲟鱼软骨为提取对象,采用碱洗、酸泡法去除非胶原成分、矿物质、多糖等物质,再用胃蛋白酶酶解法、氯化钠盐析法、去离子水透析法、冷冻干燥法等提取纯化Ⅱ型胶原蛋白;采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、氨基酸分析法、紫外吸收光谱法、傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)和圆二色色谱法对提取的Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定.结果 SDS-PAGE电泳结果显示所得提取物至少由2条链组成(α和 β);氨基酸组成分析结果显示,甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸大量存在,而酪氨酸、半胱氨酸和组氨酸的含量较低;紫外吸收光谱显示鲟鱼软骨提取物最大吸收峰与蓝鲨软骨和鱿鱼软骨Ⅱ型胶原蛋白最大吸收峰相近,此吸收峰是胶原三螺旋结构的典型紫外吸收图谱特点;红外光谱法和圆二色谱法测定结果表明,所得提取物具有良好的三螺旋结构,具备典型Ⅱ型胶原蛋白吸收特征.结论 从鲟鱼软骨中提取的胶原蛋白为Ⅱ型胶原蛋白,且纯度较高.
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