【摘 要】
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目的:探讨下调垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)的表达对人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞衰老的影响. 方法:采用体外诱导的人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞模型,LNCaP-AI细胞转染靶
【机 构】
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武警安徽省总队医院泌尿外科,安徽合肥230061解放军陆军第七十一集团军医院泌尿外科,江苏徐州221004;解放军陆军第七十一集团军医院肿瘤治疗中心,江苏徐州221004;徐州市第一人民医院泌尿外科,
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目的:探讨下调垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)的表达对人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞衰老的影响. 方法:采用体外诱导的人去势抵抗前列腺癌LNCaP-AI细胞模型,LNCaP-AI细胞转染靶向PTTG1基因的siRNA为siRNA-PTTG1组,只添加转染试剂为Mock组,转染阴性序列为NC组.于含雄激素培养液(FBS)/去除雄激素培养液(CSS)中培养各组细胞,细胞计数实验比较各组细胞数量变化.采用细胞衰老-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色试剂盒检测衰老细胞数目;Western印迹检测β-半乳糖苷酶蛋白1(Glb1)、细胞周期相关蛋白(p-21CIPI、p-27Kip1)、异染色质蛋白1γ(HP1γ)的表达情况. 结果:siRNA有效抑制了LNCaP-AI细胞中PTTG1的表达.siRNA-PTTG1组在FBS中培养,细胞数量增加,而在CSS中培养,细胞数量呈减少趋势;Mock组及NC组在上述不同培养液中细胞数量均呈增长趋势,siRNA-PTTG1组与Mock组和NC组比较差异有统计学意义(P＜0.05).SA-β-Gal染色检测衰老细胞数量,Mock组、NC组、siRNA-PTTG1组细胞染色阳性率分别为(11.3±1.24)％、(12.4±1.15)％、(63.5±2.35)％,siRNA-PTTG1组显著高于Mock组和NC组(P＜0.05).Western印迹检测转染效率显示Mock组、NC组及siRNA-PTTG1组中PTTG1相对表达量分别为0.56±0.02、0.61±0.02、0.21±0.01,p-21CIPI相对表达量分别为0.20±0.02、0.21±0.03、0.32±0.03,p-27Kip1相对表达量分别为0.20±0.03、0.22±0.01、0.38±0.02,GlB1相对表达量为0.13±0.01、0.15±0.01、0.24±0.01,HP1γ相对表达量分别为0.26±0.01、0.27±0.02、0.41±0.01;siRNA-PTFG1组与Mock组和NC组比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论:下调PTTG1基因表达可促进人去势抵抗前列腺癌细胞株LNCaP-AI细胞衰老.
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