肾移植术后病毒感染对外泌体研究影响的初步探索

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目的

探讨移植后病毒感染患者人群体液中存在的病毒颗粒和核酸物质是否会存在于提取的外泌体样品中。

方法

选取2015年1月至2017年7月于解放军第三九医院全军器官移植中心行同种异体肾脏移植手术的受者10例,其中白细胞人巨细胞病毒(HCMV)-pp65抗原检测阳性,同时血浆HCMV DNA检测结果为阳性或可疑阳性的病例5例,血浆BK病毒(BKV)DNA检测结果为阳性的病例5例。用试剂盒法提取血浆外泌体,电镜和纳米颗粒粒度分析仪(NTA)观察和分析外泌体。用实时荧光定量PCR分别检测并比较血浆、外泌体和流出液中的病毒DNA拷贝数。

结果

电镜下可见样本中的外泌体样囊泡结构,NTA检测样品浓度为(1.2~4.5)×1012颗粒/ml,颗粒直径30~200 nm。外泌体与血浆病毒DNA定量结果基本在同一数量级,而流出液中急遽降低。

结论

病毒DNA在移植后病毒感染患者外泌体样品中被大量检测出来,不仅提示了病毒传播可能利用了外泌体的生物形成过程,更提醒了现有的外泌体提取方式的局限性可能是病毒感染患者人群中外泌体研究的瓶颈。

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