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【摘要】 目的：研究尿蛋白电泳在肾脏疾病诊断中的应用。方法：收集270例肾脏病患者尿液进行尿蛋白电泳，分析各蛋白尿各组分百分比。结果：270例蛋白尿中有69例为肾小球性蛋白尿，27例为肾小管性蛋白尿，35例为生理性蛋白尿，116例为混合性蛋白尿。不同性别、民族之间蛋白尿类型不同，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：尿蛋白电泳可帮助临床诊断肾脏疾病。
【关键词】 尿蛋白电泳； 肾脏疾病； 临床应用
Analysis of 270 Cases of Urine Protein Electrophoresis in Urumqi/A E-rziguli，LI Jian-ming.//Medical innovation of China，2012，9(25):076-077
【Abstract】 Objective：To study the significance of urine protein electrophoresis in assessing the renal diseases.Method：Urine samples from 270 patients were used to electrophoresis，and analyzed percent of each elements of proteinuria.Result：Among 270 cases electrophorized 69 cases were glomerular proteinuria，27 cases were tubular proteinuria，35 cases were physical proteinuria， and 116 cases were mixed proteinuria.Different gender and nationality had different types of proteinuria， and among these results had significant difference(P<0.05).Conclusion：Urine protein electrophoresis can be propitious to detect the renal diseases.
【Key words】 Urine protein electrophoresis； Renal disease； Clinical application
First-author’s address: The People’s Hospital of Xinjiang，Urumqi 830001，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.25.043
蛋白尿是肾脏病常见的临床表现之一[1]。蛋白尿可分为生理性的、肾小管性、肾小球性、混合性四种[2]。目前有多种检测尿蛋白的方法，常用肾活检反映肾脏损伤部位，但肾活检创伤较大，存在许多不足，而尿蛋白电泳技术与肾活检结果基本吻合[3]。因此，尿蛋白电泳技术正在逐渐应用于辅助诊治肾脏疾病[4]。而对蛋白尿的来源进行准确区分，有助于诊断肾脏疾病，具有极高的临床应用价值。本文运用尿蛋白电泳技术对尿蛋白成分进行分析，区别判断尿蛋白的类型，为诊断肾脏疾病提供有利的依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择新疆维吾尔自治区人民医院2010年1-12月收治的肾脏病患者共270例，其中男147例，女123例，年龄2～86岁，平均44岁。汉族58例，少数民族212例。
1.2 仪器和试剂 仪器采用法国Sebia公司HYDRASYS全自动琼脂糖凝胶电泳系统，试剂采用公司配套的试剂盒，电泳凝胶(HYDRAGEL5，08110/02)，琼脂糖凝胶(凝胶含琼脂糖8 g，Tris巴比妥缓冲液，pH 8.8±0.1)，缓冲条(HYDRAGEL，24110/01)采用酸性结晶紫染液(浓缩结晶紫溶液加蒸馏水稀释，稀释后含2 g/L结晶紫)，柠檬酸脱色液(3 g柠檬酸+5.0 L双蒸水)，柠檬酸钠清洗液(10 g柠檬酸钠+5.0 L双蒸水)。扫描仪软件为PHORESIS450。
1.3 方法 收集患者尿液5～10 ml进行尿常规检测。如果检测结果中尿蛋白为阴性或“+”，则用原尿进行尿蛋白电泳。若为“++”以上，尿液需用生理盐水进行相应比例稀释之后电泳。吸取20 μl稀释液与80 μl尿液混匀，静置5 min。吸取5 μl加至凝胶孔中，电泳底板加入200 μl蒸馏水，吸去胶片表面水分，打开电泳仪，选择尿蛋白电泳程序(PROTEINURIE)，接缓冲条带，将凝胶置于电泳槽控温板上，启动电泳(20 ℃，221 V，91 mA)30 min。待电泳结束后取出电泳凝胶，置于染色架上，进行烘干、染色、脱色、固定、干燥程序，最后将胶片进行扫描分析。
1.4 统计学处理 数据采用SPSS 17.0和EXCEL 2003进行统计分析，对于性别之间、不同民族之间的蛋白尿类型进行 字2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
根据尿蛋白分子量大小，同时与蛋白标准带进行对比，扫描后发现尿蛋白电泳结果可分为肾小球性蛋白尿、肾小管性蛋白尿、生理性蛋白尿、混合性蛋白尿。270例蛋白尿中有69例肾小球性蛋白尿(25.6%)，电泳条带显示位置在样本加样点与白蛋白之间，主要是白蛋白。27例肾小管性蛋白尿(10%)，电泳条带位于白蛋白和凝胶片阳性端之间。116例为混合性蛋白尿(42.9%)，35例为生理性蛋白尿(12.9%)，尿蛋白含量很低。其余为阴性尿。见表1。
表1 270例尿蛋白电泳结果
类型 例数(例) 蛋白相对百分比(%)
肾小球性蛋白尿 69 25.6
肾小管性蛋白尿 27 10.0 混合性蛋白尿 116 42.9
生理性蛋白尿 35 12.9
阴性 23 8.5
本研究收集270例肾脏病患者的尿液进行尿蛋白电泳。分析发现少数民族患者占据大多数(78.5%)，结果以混合性蛋白尿居多。男、女比例适当，基本可以达到1:1。见表2。
表2 不同性别、民族患者尿蛋白电泳结果 例
类型 性别 族别
男 女 汉族 少数民族
肾小球性蛋白尿 45 24 7 62
肾小管性蛋白尿 16 11 11 16
混合性蛋白尿 69 47 16 100
生理性蛋白尿 11 24 14 21
阴性 6 17 9 14
对于表2所示结果分别进行不同性别患者蛋白尿类型的 字2检验。以各种类型蛋白尿的结果和男、女不同性别之间提出零假设，认为不同性别之间蛋白尿类型有差异，根据概率乘法法则，计算 字2值，确定自由度df(本次统计中df=4)，由表2中数据进行计算 字2值为19.61， 字2> 字4，0.05，即P<0.05。分析发现，不同性别之间蛋白尿类型差异具有统计学意义(P<0.05)。
同样，对于表2所示结果分别进行不同民族患者蛋白尿类型的 字2检验。以各种类型蛋白尿的结果和不同民族之间提出零假设，认为不同民族之间蛋白尿类型有差异，根据概率乘法法则，计算 字2值，确定自由度df(本次统计中df=4)，由表2中数据进行计算 字2值为101.86， 字2> 字4，0.05，即P<0.05。分析发现，不同民族之间蛋白尿类型差异具有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
尿蛋白电泳可以区分尿中不同组分[5]。根据尿蛋白电泳图谱分析发现，以白蛋白为界，分子量小于白蛋白的低分子蛋白能通过肾小球滤膜，被肾小管重吸收，当肾小管受损时，这些低分子蛋白会增多，产生肾小管性蛋白尿，提示肾小管受损。分子量高于白蛋白的高分子蛋白会使肾小球通透性增大，损伤肾小球，产生肾小球性蛋白尿。而当病变同时累及肾小球和肾小管时，会产生混合型蛋白尿。
本研究270例蛋白尿中，有147例为男性，123例女性，其中58例汉族，212例为少数民族。主要以混合性蛋白尿为主。由于样本采集所在医院为民族聚居区，因此，样本收集过程中少数民族居多，这也符合新疆属于多民族地区的特点。统计学分析不同性别、民族之间蛋白尿类型差异具有统计学意义，分析原因之一为本次收集标本具有随机性。此外，男女之间，不同民族之间由于其生理结构特点和生活习性不同，也会导致蛋白尿类型有所差异。
检测肾损伤部位和程度的方法很多，以往肾活检可以反映肾损伤程度，但活检创伤大[6]。而尿蛋白电泳能检测尿中成分的变化，可协助临床诊断肾损伤的程度，而且整个过程简便、无创伤，因此，对肾脏疾病的诊断、治疗、预后具有重要价值。
参考文献
[1] 刘恩才.尿蛋白电泳在肾脏疾病中的临床应用[J].内蒙古医学杂志，2011，43(8):962-963.
[2] 吴双，吴晓虹，黄伟，等.尿蛋白电泳在临床上的应用[J].中国医学研究与临床，2007，5(6):49-50.
[3] 沈霞，张敏华，汪萍，等.非浓缩尿蛋白电泳的临床应用[J].中华检验医学杂志，2001，24(5):266.
[4] 廖伟.尿蛋白电泳临床应用[J].家庭医药：医药论坛，2009，(1):29-30.
[5] 董雪梅，孙睿轩，周秀，等.尿蛋白电泳在肾脏疾病评估中的作用[J].武警医学院学报，2008，17(12):1077-1079.
[6] 陈立，庄叶萍.SDS-AGE非浓缩尿蛋白电泳的建立和应用[J].天津医科大学学报，2002，8(1):109.
(收稿日期：2012-05-10) (本文编辑：连胜利)
【关键词】 尿蛋白电泳； 肾脏疾病； 临床应用
Analysis of 270 Cases of Urine Protein Electrophoresis in Urumqi/A E-rziguli，LI Jian-ming.//Medical innovation of China，2012，9(25):076-077
【Abstract】 Objective：To study the significance of urine protein electrophoresis in assessing the renal diseases.Method：Urine samples from 270 patients were used to electrophoresis，and analyzed percent of each elements of proteinuria.Result：Among 270 cases electrophorized 69 cases were glomerular proteinuria，27 cases were tubular proteinuria，35 cases were physical proteinuria， and 116 cases were mixed proteinuria.Different gender and nationality had different types of proteinuria， and among these results had significant difference(P<0.05).Conclusion：Urine protein electrophoresis can be propitious to detect the renal diseases.
【Key words】 Urine protein electrophoresis； Renal disease； Clinical application
First-author’s address: The People’s Hospital of Xinjiang，Urumqi 830001，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.25.043
蛋白尿是肾脏病常见的临床表现之一[1]。蛋白尿可分为生理性的、肾小管性、肾小球性、混合性四种[2]。目前有多种检测尿蛋白的方法，常用肾活检反映肾脏损伤部位，但肾活检创伤较大，存在许多不足，而尿蛋白电泳技术与肾活检结果基本吻合[3]。因此，尿蛋白电泳技术正在逐渐应用于辅助诊治肾脏疾病[4]。而对蛋白尿的来源进行准确区分，有助于诊断肾脏疾病，具有极高的临床应用价值。本文运用尿蛋白电泳技术对尿蛋白成分进行分析，区别判断尿蛋白的类型，为诊断肾脏疾病提供有利的依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择新疆维吾尔自治区人民医院2010年1-12月收治的肾脏病患者共270例，其中男147例，女123例，年龄2～86岁，平均44岁。汉族58例，少数民族212例。
1.2 仪器和试剂 仪器采用法国Sebia公司HYDRASYS全自动琼脂糖凝胶电泳系统，试剂采用公司配套的试剂盒，电泳凝胶(HYDRAGEL5，08110/02)，琼脂糖凝胶(凝胶含琼脂糖8 g，Tris巴比妥缓冲液，pH 8.8±0.1)，缓冲条(HYDRAGEL，24110/01)采用酸性结晶紫染液(浓缩结晶紫溶液加蒸馏水稀释，稀释后含2 g/L结晶紫)，柠檬酸脱色液(3 g柠檬酸+5.0 L双蒸水)，柠檬酸钠清洗液(10 g柠檬酸钠+5.0 L双蒸水)。扫描仪软件为PHORESIS450。
1.3 方法 收集患者尿液5～10 ml进行尿常规检测。如果检测结果中尿蛋白为阴性或“+”，则用原尿进行尿蛋白电泳。若为“++”以上，尿液需用生理盐水进行相应比例稀释之后电泳。吸取20 μl稀释液与80 μl尿液混匀，静置5 min。吸取5 μl加至凝胶孔中，电泳底板加入200 μl蒸馏水，吸去胶片表面水分，打开电泳仪，选择尿蛋白电泳程序(PROTEINURIE)，接缓冲条带，将凝胶置于电泳槽控温板上，启动电泳(20 ℃，221 V，91 mA)30 min。待电泳结束后取出电泳凝胶，置于染色架上，进行烘干、染色、脱色、固定、干燥程序，最后将胶片进行扫描分析。
1.4 统计学处理 数据采用SPSS 17.0和EXCEL 2003进行统计分析，对于性别之间、不同民族之间的蛋白尿类型进行 字2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
根据尿蛋白分子量大小，同时与蛋白标准带进行对比，扫描后发现尿蛋白电泳结果可分为肾小球性蛋白尿、肾小管性蛋白尿、生理性蛋白尿、混合性蛋白尿。270例蛋白尿中有69例肾小球性蛋白尿(25.6%)，电泳条带显示位置在样本加样点与白蛋白之间，主要是白蛋白。27例肾小管性蛋白尿(10%)，电泳条带位于白蛋白和凝胶片阳性端之间。116例为混合性蛋白尿(42.9%)，35例为生理性蛋白尿(12.9%)，尿蛋白含量很低。其余为阴性尿。见表1。
表1 270例尿蛋白电泳结果
类型 例数(例) 蛋白相对百分比(%)
肾小球性蛋白尿 69 25.6
肾小管性蛋白尿 27 10.0 混合性蛋白尿 116 42.9
生理性蛋白尿 35 12.9
阴性 23 8.5
本研究收集270例肾脏病患者的尿液进行尿蛋白电泳。分析发现少数民族患者占据大多数(78.5%)，结果以混合性蛋白尿居多。男、女比例适当，基本可以达到1:1。见表2。
表2 不同性别、民族患者尿蛋白电泳结果 例
类型 性别 族别
男 女 汉族 少数民族
肾小球性蛋白尿 45 24 7 62
肾小管性蛋白尿 16 11 11 16
混合性蛋白尿 69 47 16 100
生理性蛋白尿 11 24 14 21
阴性 6 17 9 14
对于表2所示结果分别进行不同性别患者蛋白尿类型的 字2检验。以各种类型蛋白尿的结果和男、女不同性别之间提出零假设，认为不同性别之间蛋白尿类型有差异，根据概率乘法法则，计算 字2值，确定自由度df(本次统计中df=4)，由表2中数据进行计算 字2值为19.61， 字2> 字4，0.05，即P<0.05。分析发现，不同性别之间蛋白尿类型差异具有统计学意义(P<0.05)。
同样，对于表2所示结果分别进行不同民族患者蛋白尿类型的 字2检验。以各种类型蛋白尿的结果和不同民族之间提出零假设，认为不同民族之间蛋白尿类型有差异，根据概率乘法法则，计算 字2值，确定自由度df(本次统计中df=4)，由表2中数据进行计算 字2值为101.86， 字2> 字4，0.05，即P<0.05。分析发现，不同民族之间蛋白尿类型差异具有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
尿蛋白电泳可以区分尿中不同组分[5]。根据尿蛋白电泳图谱分析发现，以白蛋白为界，分子量小于白蛋白的低分子蛋白能通过肾小球滤膜，被肾小管重吸收，当肾小管受损时，这些低分子蛋白会增多，产生肾小管性蛋白尿，提示肾小管受损。分子量高于白蛋白的高分子蛋白会使肾小球通透性增大，损伤肾小球，产生肾小球性蛋白尿。而当病变同时累及肾小球和肾小管时，会产生混合型蛋白尿。
本研究270例蛋白尿中，有147例为男性，123例女性，其中58例汉族，212例为少数民族。主要以混合性蛋白尿为主。由于样本采集所在医院为民族聚居区，因此，样本收集过程中少数民族居多，这也符合新疆属于多民族地区的特点。统计学分析不同性别、民族之间蛋白尿类型差异具有统计学意义，分析原因之一为本次收集标本具有随机性。此外，男女之间，不同民族之间由于其生理结构特点和生活习性不同，也会导致蛋白尿类型有所差异。
检测肾损伤部位和程度的方法很多，以往肾活检可以反映肾损伤程度，但活检创伤大[6]。而尿蛋白电泳能检测尿中成分的变化，可协助临床诊断肾损伤的程度，而且整个过程简便、无创伤，因此，对肾脏疾病的诊断、治疗、预后具有重要价值。
参考文献
[1] 刘恩才.尿蛋白电泳在肾脏疾病中的临床应用[J].内蒙古医学杂志，2011，43(8):962-963.
[2] 吴双，吴晓虹，黄伟，等.尿蛋白电泳在临床上的应用[J].中国医学研究与临床，2007，5(6):49-50.
[3] 沈霞，张敏华，汪萍，等.非浓缩尿蛋白电泳的临床应用[J].中华检验医学杂志，2001，24(5):266.
[4] 廖伟.尿蛋白电泳临床应用[J].家庭医药：医药论坛，2009，(1):29-30.
[5] 董雪梅，孙睿轩，周秀，等.尿蛋白电泳在肾脏疾病评估中的作用[J].武警医学院学报，2008，17(12):1077-1079.
[6] 陈立，庄叶萍.SDS-AGE非浓缩尿蛋白电泳的建立和应用[J].天津医科大学学报，2002，8(1):109.
(收稿日期：2012-05-10) (本文编辑：连胜利)