【摘 要】
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目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质细胞( BMSCs)的体外成骨能力. 方法取新西兰白兔20只,自双侧股骨大转子取材培养BMSCs,左侧来源细胞定为实验组,右侧为对照
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目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质细胞( BMSCs)的体外成骨能力. 方法取新西兰白兔20只,自双侧股骨大转子取材培养BMSCs,左侧来源细胞定为实验组,右侧为对照组.以脂质体介导TGF-β1基因转染BMSCs后,观察细胞的形态学特征,以四唑盐(MTT)法检测TGF-β1转染对细胞增殖的影响.此外,通过碱性磷酸酶(AL P)染色及对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测ALP活性;免疫组化法检测Ⅰ型胶原表达;四环素荧光标记检测钙结节形成能力. 结果 TGF-β1基因转染BMSCs后,转染细胞具有成骨细胞的结构特征和生物学特性,且细胞增殖能力加强.转染细胞ALP染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色均呈强阳性, 定量分析显示TGF-β1转染组细胞上清孵育的BMSCs的ALP活性为(3.51±0.12)U/ml,空载体转染组为(1.72±0.08)U/ml,空白对照组为(1.67±0.11)U/ml.Ⅰ型胶原表达的免疫组化阳性指数瞬时表达组为0.167±0.001,而对照组为0.043±0.0 01.转染细胞12 d形成钙结节(对照组为18 d),数量亦显著增加. 结论 TGF-β1基因转染可促进BMSCs的体外成骨能力.
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