东方巴贝虫cDNA文库的构建与免疫学筛选

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lilanlan999
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目的构建东方巴贝虫(Babesia orientalis)cDNA文库,从中筛选免疫学阳性的克隆。方法用东方巴贝虫感染牛,提纯红细胞内虫体的总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增后将其连接于噬菌体载体(λTriplEx2),通过体外包装,建成东方巴贝虫cDNA文库,并进行扩增。用兔抗东方巴贝虫的血清筛选cDNA文库,阳性克隆经大肠埃希菌BM25.8自身环化酶将噬菌体重组子λTriplEx2转化为相应的质粒重组子pTriplEx2,PCR鉴定插入片段大小,并测序,用Blast对测序结果进行同源性分析,并对
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