【摘 要】
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目的通过体外细胞分化模型探讨Notch信号通路对角膜缘上皮细胞分化过程中黏液素5AC(MUC5AC)表达的影响及其临床意义。方法 Western blot检测体外细胞培养24和48h时Notch1、No
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科,武汉大学中南医院眼科
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目的通过体外细胞分化模型探讨Notch信号通路对角膜缘上皮细胞分化过程中黏液素5AC(MUC5AC)表达的影响及其临床意义。方法 Western blot检测体外细胞培养24和48h时Notch1、Notch2及Notch3蛋白在小鼠角膜缘上皮细胞中的表达情况;以小鼠体外正常培养角膜缘上皮细胞作为对照组,靶向转染Notch3siRNA的细胞作为实验组,培养24、48和72h后运用Western blot和Real-time PCR检测MUC5AC蛋白及mRNA的表达水平;RT-PCR检测转谷氨酰胺酶1mRNA表达强度变化。结果 Western blot结果显示Notch3蛋白在角膜缘上皮细胞的表达最高,其次是Notch2,Notch1表达不明显。与对照组相比,实验组MUC5AC的蛋白合成及mRNA表达显著下降,其蛋白合成于24、48和72h分别下降了(64.3±35.0)%、(39.5±11.0)%和(41.3±8.3)%;mRNA分别下降了(42.9±14.2)%、(45.0±18.0)%和(46.4±21.0)%;转谷氨酰胺酶1的基因表达明显增强,24、48和72h分别增加了(75.2±11.3)%、(89.7±15.5)%和(101.0±25.0)%。结论 Notch信号通路可影响MUC5AC基因及蛋白合成,对Notch信号的调节可能是治疗黏液素分泌不足型眼表疾病的一个新途径。
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