人外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定

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<正>树突状细胞(DCs)是已知功能最强的抗原提呈细胞(APCs),可持续高表达MHCⅠ类及Ⅱ类分子,高表达共刺激分子及粘附分子,受刺激后分泌高水平的IL-12,体内外均可诱导较强的免疫应答.在小鼠模型中,骨髓来源的DC经体外肿瘤抗原冲击后,少量回输就可以治疗荷瘤小鼠,使低免疫原性的已建立肿瘤消退;首例临床方案将DC体外经抗独特型抗体冲击致敏后,回输息者治疗B细胞淋巴瘤取得了较好疗效.我们应用GM-CSF和IL-4从人外周血中扩增出了DC.由新鲜正常人外周血分离获得单个核细胞,培养贴壁2小时后弃除悬浮细胞,以AIM-V无血清培养并加入hGM-CSF1000U/ml,hIL-4 500U/ml,3天后补加细胞因子.在培养第3天可见培养板中心出现较多细胞聚集体.继续培养2天后,有典型的树突状细胞从聚体脱落,呈悬浮、畸形的毛刺状细胞.从100ml人外周血平均可获得1×10~7细胞.表型分析
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