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背景：体外分离培养纯度高、活力强且生物学特性稳定的卵巢表面上皮难度很大，目前原代培养主要采用组织块贴壁法和酶消化法，但这两种方法在取材、细胞活力及细胞纯度上都存在一定的问题。目的：建立一种高效实用的人卵巢表面上皮分离、培养和鉴定方法。方法：创新性地运用细胞刷刷取人卵巢表面上皮，以红细胞裂解法、差速贴壁法对细胞进行分离纯化，并向无血清DMEM-F12培养基中添加人表皮生长因子进行细胞培养。在倒置显微镜下观察细胞形态，应用苏木精一伊红染色和免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定，并绘制生长曲线。结果与结论：卵巢表面