【摘 要】
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目的:探讨鸡IFN-α-IL-18融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB(NF-κB)的影响。方法:构建重组酵母表达质粒p PICZ-IFN-α、p PICZ-IL-18和p PICZ-IFN-α-IL-18,电转化
【机 构】
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河南省动物疫病与公共安全院士工作站/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室
【基金项目】
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河南省科技攻关项目(132102110117)
论文部分内容阅读
目的:探讨鸡IFN-α-IL-18融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB(NF-κB)的影响。方法:构建重组酵母表达质粒p PICZ-IFN-α、p PICZ-IL-18和p PICZ-IFN-α-IL-18,电转化酵母菌X-33后以1%甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达IFN-α、IL-18及IFN-α-IL-18蛋白,淋巴细胞转化试验初步检测表达产物生物学活性,双抗体夹心法测定不同时段淋巴细胞中总NF-κB和细胞核中NF-κB的含量。结果:酵母培养上清液中存在分子量分别为22、23和43 k D的目的蛋白;表达的IFN-α-IL-18和IL-18均能明显促进鸡外周血淋巴细胞转化(P<0.05),IFN-α对淋巴细胞转化有促进作用,但总体差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,经IFN-α-IL-18和IL-18作用的鸡淋巴细胞中总NF-κB含量明显增加(P<0.05),细胞核中NF-κB含量差异极显著(P<0.01),IFN-α作用的淋巴细胞中总NF-κB含量与对照组相比差异不显著(P>0.05),细胞核中NF-κB含量显著增加(P<0.05)。结论:IFN-α-IL-18及IL-18能够明显促进淋巴细胞转化,IFN-α促进淋巴细胞转化活性较弱,这种促淋转机制与NF-κB的表达、活化及核质转运有关,为进一步研究IFN-α-IL-18融合蛋白的功能及其在疫病防控中的作用奠定了基础。
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