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目的研制抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的人源噬菌体单链抗体，并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法 以重组的丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3为固相抗原，利用亲和筛选的原理，从噬菌体抗体库中经过5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选过程及酶联免疫吸附试验(ELISA)、斑点免疫杂交试验和DNA序列分析，获得HCV NS3的人源单链抗体；用该抗体与不同来源的HCV NS3抗原进行反应；对10例石蜡包埋的丙型肝炎患者肝组织进行免疫组化鉴定。结果 ELISA结果表明，所制备的HCV NS3人源单链抗体能与不同来源的HCV NS3抗原特异性结合(吸光度A值为1.38)；免疫组化结果表明，该抗体能够特异性识别丙型肝炎患者肝组织HCV NS3抗原，与正常肝组织及乙型肝炎病毒(HBV)的表面抗原均无交叉反应。结论 此法制备的单链抗体亲和性好，特异性强，且制备方法简便，周期短，可用于HCV NS3病原的检测。