【摘 要】
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目的:采用ITS DNA条形码技术鉴定牛至(Origanum vulgare L.)及其混伪品.方法:试剂盒法提取样品基因组DNA,通用引物5F-4R扩增ITS序列,Sanger测序法双向测序.使用BLAST法、遗传
【机 构】
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重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,重庆 南川408435;新疆维吾尔自治区中药民族药研究所,新疆 乌鲁木齐830004
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目的:采用ITS DNA条形码技术鉴定牛至(Origanum vulgare L.)及其混伪品.方法:试剂盒法提取样品基因组DNA,通用引物5F-4R扩增ITS序列,Sanger测序法双向测序.使用BLAST法、遗传距离Kimura双参数模型法、单核苷酸多态性分析、邻近树4种不同方法对牛至及其混伪品74条ITS序列进行鉴定分析.结果:ITS序列PCR扩增和测序成功率均为100％.试验样本种内平均遗传距离为0.002(0～0.008),种间平均遗传距离为0.125(0.008～0.239),存在明显“Barcoding gap”;聚类分析显示所有牛至样品单独聚为一支,呈现单系性.BLAST法、遗传距离法和邻近树可成功鉴定牛至及其混伪品,而牛至ITS序列无特异性位点,单核苷酸多态性分析不能有效鉴定牛至及其混伪品.结论:ITS序列能有效鉴定牛至及其混伪品,可作为牛至鉴定的DNA条形码.
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