鱼腥藻PCC 7120中al3556蛋白的表达与纯化

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【摘要】

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琥珀酸半醛脱氢酶在生物体中发挥重要的生理功能.通过BLAST序列分析,发现鱼腥藻PCC 7120中all3556基因编码琥珀酸半醛脱氢酶.实验通过常规PCR从鱼腥藻PCC 7120基因组中克隆了

【作者】

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王小琴李至敏雷国风李志敏

【机构】

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江西农业大学生物科学与工程学院,江西南昌,330045江西农业大学理学院,江西南昌,330045;江西农业大学生物科学与工程学院,江西南昌 330045;江西省农业微生物资源开发与利用工程

【出处】

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江西农业学报

【发表日期】

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2017年5期

【关键词】

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鱼腥藻PCC7120 all3556蛋白蛋白表达与纯化

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琥珀酸半醛脱氢酶在生物体中发挥重要的生理功能.通过BLAST序列分析,发现鱼腥藻PCC 7120中all3556基因编码琥珀酸半醛脱氢酶.实验通过常规PCR从鱼腥藻PCC 7120基因组中克隆了all3556基因,将该基因构建到pET-28a载体上并在大肠杆菌BL21(DE3)菌体中表达.经过SDS-PAGE电泳,结果表明:all3556蛋白可以在该表达体系中高效可溶性表达.利用镍亲和层析纯化方法得到了纯度大于95%的all3556蛋白,蛋白收率约为27 mg/g菌体.研究为进一步阐明all3556蛋白的催化功能及机制奠定了重要基础.

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