番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测

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通过RT—PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区,将其分别克隆到pBD—GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD—GALA—eIF4E,pBD—GAL4-eIFiso4E。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的番木瓜eIF4E,eIFiso4E基因编码区,并成功克隆到pBD—GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,在SD/-His-Trp营养缺
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