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材料:①菌株、质粒及细胞株:E.coli M15/SG10039、表达载体pQE-30由本室保存,pGEM^-T-Easy测序载体购自Promega公司,新鲜肝组织由本院普外科提供。②主要试剂:TagDNA聚合酶、限制性内切酶Bam HI、Hind Ⅲ、Kpn Ⅰ、T4DNA连接酶、Olig odT12-18、引物合成(TaKaRa);NALON凝胶(QIAGEN);逆转录酶(AMV)(Promega);GoldenTag酶(PERKIN ELMER);