探讨不同浓度不同作用时间下脂多糖（LPS）对A549细胞炎性因子基因表达的影响，为进一步确立急性呼吸窘迫综合征（ARDS）细胞模型的最适浓度-时间条件奠定基础。
方法取A549细胞，用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基于37 ℃、5%CO2培养箱常规培养，取对数生长期的A549细胞进行传代，计数细胞并调整细胞密度为（5～7）×105个，于6孔板中培养2 d，当细胞融合至50%～60%时换无血清培养基DMEM培养12 h。取10 mg LPS加入10 mL DMEM培养基振荡混匀，配制1 g/L储存液；取0.5、1.0、2.5 mL的LPS储存液用DMEM溶液稀释定容至50 mL，配制成0、10、20、50 mg/L的LPS工作液。然后以0、10、20、50 mg/L的LPS分别作用0、1、3、5 h，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞白细胞介素（IL-6、IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA表达，以10 mg/L的LPS作用0 h为时间对照组，以0 mg/L的LPS作用1 h为浓度对照组，采用2-ΔΔCt法计算基因表达量。
结果①时间因素方面，在相同LPS浓度作用下，A549细胞经10 mg/L的LPS作用1 h时IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平均明显高于0 h时〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：5.71±0.42比1.00±0.00，IL-1β mRNA（2-ΔΔCt）：5.63±0.30比1.00±0.00，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：5.38±0.61比1.00±0.00，均P<0.01〕，其他时间点间细胞炎性因子基因表达水平均无明显改变。②浓度因素方面，在相同作用时间下，A549细胞经10 mg/L的LPS作用1 h时IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平均明显高于0 mg/L的LPS作用1 h时〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：5.70±0.64比1.00±0.00，IL-1β mRNA（2-ΔΔCt）：6.25±0.25比1.00±0.00，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：5.57±0.25比1.00±0.00，均P<0.01〕，其他浓度LPS组间炎性因子基因表达水平均无明显改变。
结论10 mg/L的LPS作用A549细胞1 h为建立ARDS细胞模型的最适作用浓度-时间条件。