双启动子shRNA干扰的协同效应

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目的构建含有两段不同靶特异干扰序列的双启动子shRNA载体,并比较其与单个靶特异干扰序列的shRNA载体的干扰效应。方法通过PCR方法扩增H1启动子序列,构建含有u6和Hl双启动子的shRNA载体,命名为PLKO.1-H1。设计2对针对EGFP基因不同位点的shRNA片段,同时设计2对无干扰作用的片段shSl和shS2作为对照。分别构建携带上述片段的慢病毒表达载体shEGFPl-H1-shS2、shSl-H1-shEGFP2及shEGFPl一HI—shEGFP2,同时以shSl-HI-shS2质粒作为对照
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